一、T細胞亞群檢測：
（一）T細胞花結(jié)形成試驗：細胞表面有綿羊紅細胞（SRBC）的受體，可與SRBC形成花環(huán)樣細胞，稱為紅細胞玫瑰花環(huán)形成或E玫瑰花環(huán)形成。
1、正常參考值：EtRFC64.4±6.7%；EaRFC23.6±3.5%；EsRFC3.3±2.6%。
2、臨床意義：
（1）E花環(huán)值減低： ①見于免疫缺陷病（如Digeorge綜合征，Wiskott－Aldrich綜合征，Nezelof綜合征）以及原發(fā)性細胞和體液免疫同時缺乏性疾病。上述這些病當用胸腺素等治療后，EaRFC可明顯增高。②某些惡性腫瘤、麻疹、麻疹腦炎、腮腺炎、帶狀皰疹、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、皮肌炎、瘤型麻風以及應用免疫抑制劑時，亦見E花環(huán)值降低。有人認為某些惡性腫瘤EaRFC可早于病情惡化的臨床表現(xiàn)，而EtRFT仍可正常�！�
（2）E花環(huán)值增高：見于甲狀腺功能亢進、甲狀腺炎（此兩癥病情緩解時可恢復正常）、重癥肌無力、慢性活動性或遷延性肝炎、慢性淋巴細胞白血病以及移植排斥時。
（二）細胞轉(zhuǎn)化試驗：T淋巴細胞與有絲分裂原在體外共同培養(yǎng)時，受到后者的刺激可發(fā)生形態(tài)學和生物化學的變化，部分小淋巴細胞轉(zhuǎn)化為不成熟的母細胞，并進行有絲分裂，這種方法稱為淋巴細胞轉(zhuǎn)化試驗。又稱T細胞返幼試驗。T細胞在體外培養(yǎng)時，受到有絲分裂原如植物血凝素（PHA）刺激后，可轉(zhuǎn)化體積大的母細胞。
1、正常參考值：60.l±7.6%
2、臨床意義：T淋巴細胞在體外經(jīng)植物血凝素激活后，可轉(zhuǎn)化為淋巴母細胞，根據(jù)淋巴細胞的轉(zhuǎn)化情況，可反應機體的細胞免疫水平。淋巴細胞轉(zhuǎn)化率降低表示細胞免疫水平低下，可見于運動失調(diào)性毛細血管擴張癥、惡性腫瘤、何杰金病、淋巴瘤、淋巴肉芽腫、重癥真菌感染、重癥結(jié)核、瘤型麻風等。此外，本試驗還可幫助觀察疾病的療效和預后，經(jīng)治療后轉(zhuǎn)化率由低值轉(zhuǎn)變?yōu)檎Ｕ弑硎绢A后良好，反之則預后不良。
（三）T細胞分化抗原測定：T細胞膜表面有100多種特異性抗原，現(xiàn)已制備了多種單克隆抗體，WHO（1986）統(tǒng)稱為白細胞分化抗原（CD）。例如CD3代表總T細胞，CD4代表T輔助細胞（TH），CD8代表T細胞毒性細胞（TC）等。應用這些細胞的單克隆抗體與T細胞表面抗原結(jié)合后，再與熒光標記二抗（兔或羊抗鼠IgG）反應，在熒光顯微鏡下或流式細胞儀中計數(shù)CD的百分率。
1、正常參考值：免疫熒光法（IFA）：CD3為63.1%±10.8%；CD4（TH）為42.8%±9.5%；CD8（TS）為19.6%±5.9%；CD4/ CD8（TH/TS）為（2.2±0.7）/1。流式細胞術(shù)：CD3為61%～85%；CD4為28%～58%；CD8為19%～48%；CD4/ CD8為0.9～2.0/1。
2、臨床意義:
①CD3降低：見于自身免疫性疾病，如SLE、類風濕關(guān)節(jié)炎等。
②CD4降低：見于惡性腫瘤、遺傳性免疫缺陷癥、艾滋病、應用免疫抑制劑者。
③CD8減低：見于自身免疫性疾病或變態(tài)反應性疾病。
④CD4/ CD8比值增高：見于惡性腫瘤、自身免疫性疾病、病毒性感染、變態(tài)反應等；CD4/ CD8比值減低：見于艾滋�。ǔ�<0.5）。
⑤監(jiān)測器官移植排斥反應時CD4/ CD8比值增高預示可能發(fā)生排斥反應。
⑥CD3、CD4、CD8較高且有CD1、CD2、CD5、CD7增高則可能為T細胞型急性淋巴細胞白血病。
二、B細胞分化抗原檢測：B細胞具有多種特異性抗原和受體，據(jù)此建立了相應的檢測方法，一般用以研究B細胞各分化發(fā)育階段的特性，也可藉以鑒定和計數(shù)各階段B細胞在人外周血和淋巴樣組織的分布以及疾病時的變化動態(tài)，為臨床提供診治相關(guān)疾病的有用信息。B細胞表面有CD， CD19、CD20、CD21、CD22和CD29等分化抗原，其中有些系全部B細胞所共有，而有些僅活化B細胞所特有，據(jù)此可用相應的CD系列單克隆抗體，通過間接熒光免疫法、酶免疫組化或ABC法加以檢測。健康成年人外周血CD20陽性細胞約占淋巴細胞總數(shù)的8％～12％。
1、正常參考值：CD19＋11.74±3.37％。
2、臨床意義：
（1）升 高：見于急性淋巴細胞白血�。˙細胞型，且有Smlg、HLA-D表達），慢性淋巴細胞白血病和Burkitt淋巴瘤等。
（2）降 低：見于無丙種球蛋白血癥，使用化療或免疫抑制劑后。
三、自然殺傷細胞免疫檢測：
（一）自然殺傷細胞活性檢測：自然殺傷細胞是NK細胞的簡稱。它不同于T細胞，也不同于K細胞，對靶細胞殺傷時既不需特異性抗體參加，也不需抗原預先致敏。主要存在于外周血、脾臟和骨髓中，淋巴結(jié)中含量極少，胸腺中沒有發(fā)現(xiàn)�，F(xiàn)一般認為，自然殺傷細胞來源于骨髓。其免疫活性比K細胞、T細胞要小得多，但T細胞獲得殺傷能力大約需10天左右的致敏時間，K細胞的殺傷作用又必須有IgG的特異性抗體的參與，而自然殺傷細胞卻能立即發(fā)揮非特異性殺傷靶細胞的作用，尤其是對多種腫瘤細胞有迅速殺傷和溶解作用。因此，自然殺傷細胞對癌癥的監(jiān)視作用已越來越受到重視。
1、正常參考值：自然殺傷細胞占周圍淋巴細胞總數(shù)：3%～20% 51Cr釋放法：自然釋放率：＜10%～15% 自然殺傷率：47.6%～76.8% 51Cr利用率：6.5%～47.8% LDH:39.49±12.01 。
2、臨床意義：
(1)自然殺傷細胞總數(shù)正常但活力下降：腫瘤、慢性多發(fā)性硬化癥、感染性疾病。
(2)自然殺傷細胞總數(shù)和活力均下降：急性多發(fā)性硬化癥、系統(tǒng)性紅斑狼瘡。
（二）抗體依賴性細胞介導的細胞毒（ADCG）測定：ADCG特異性由抗體決定，這類細胞表面有抗體Fc受體，當與相應的抗體結(jié)合后，抗體被激活，ADCG細胞得以與抗體的Fc受體結(jié)合，引起靶細胞的殺傷與破壞。
1、正常參考值：51Cr釋放法：51Cr釋放率<10％為陰性，10％～20％為可疑陽性，≥20％為陽性；溶血空斑法<5.6％為陰性。
2、臨床意義：
（1）增 高：見于自身免疫性疾病，如自身免疫性血小板減少癥、自身免疫性溶血性貧血、免疫性粒細胞缺乏癥，甲狀腺功能亢進，移植排斥反應等。
（2）降 低：見于惡性腫瘤、免疫缺陷病、慢性肝炎、腎功能衰竭等。
四、細胞因子檢測：
（一）白介素－2（IL-2）活性及其受體測定：它是由多細胞來源（主要由活化T細胞產(chǎn)生），又具有多向性作用的細胞因子（主要促進淋巴細胞生長、增殖、分化）；對機體的免疫應答和抗病毒感染等有重要作用，能刺激已被特異性抗原或致絲裂因數(shù)啟動的T細胞增殖；能活化T細胞，促進細胞因子產(chǎn)生；刺激NK細胞增殖，增強NK殺傷活性及產(chǎn)生細胞因子，誘導LAK細胞產(chǎn)生；促進B細胞增殖和分泌抗體；激活巨噬細胞。檢測體內(nèi)IL-2可判斷機體免疫功能。
1、正常參考值：5～15kU／L。
2、臨床意義：
（1）增 高：見于自身免疫性疾病（SLE、類風濕關(guān)節(jié)炎等）、再障、多發(fā)性骨髓瘤、排斥反應等。
（2）降 低：鑒于免疫缺陷�。ò滩 ⒙�(lián)合免疫缺陷病等）惡性腫瘤、I型糖尿病、某些病毒感染等。
（二）腫瘤壞死因子（TNF）測定：TNF主要由巨噬細胞和單核細胞產(chǎn)生。已發(fā)現(xiàn)TNF可對眾多的組織器官產(chǎn)生生物效應，它是體內(nèi)細胞因子網(wǎng)絡中重要的多功能物質(zhì)。TNF具有多種生物效應，主要是介導抗腫瘤及調(diào)節(jié)機體的免疫功能，也是炎癥反應介質(zhì)之一，參與炎癥病變的多方面病理變化。測定血清或其他體液中TNF濃度，是基礎(chǔ)醫(yī)學和臨床多種疾病的診療很有價值的指標。
1、正常參考值：4.3＋－2.8ug／L。
2、臨床意義：
（1）腫瘤：許多腫瘤細胞可產(chǎn)生TNF，因此在多種腫瘤時機體內(nèi)TNF表達明顯升高。TNF又可通過細胞毒作用，殺死腫瘤細胞或抑制某些腫瘤細胞增殖。
（2）風濕性關(guān)節(jié)炎患者的滑膜中有大量TNF。
（3）在膿毒敗血癥、感染性肺炎等嚴重炎性疾病時血清中TNF含量明顯增高。許多寄生蟲病患者中TNF也顯著改變。艾滋病患者體液中TNF也高于正常人。瘧疾抗原、病毒和細菌均可誘導TNF產(chǎn)生，TNF又反過來具有抗病毒、抗細菌、抗瘧疾作用。
（4）TNF與移植排斥反應密切相關(guān)，在患者的血清或尿液中TNF的表達與排斥反應程度呈正相關(guān)。
（三）干擾素（IFN）測定：IFN分為兩型，Ⅰ型干擾索包括α-IFN和β-IFN是由白細胞和成纖維細胞產(chǎn)生，Ⅱ型干擾素，又稱γ-IFN或免疫干擾素是由有絲分裂原刺激T淋巴細胞產(chǎn)生。干擾素是一種高效的抗病毒生物活性物質(zhì)，又是一種具有廣泛免疫調(diào)節(jié)作用的淋巴因子。干擾素檢測方法較多，如空斑減少法、病毒定量法、放免測定法與細胞病變抑制法等。
1、正常參考值：1～4kU／L（ELISA法）。
2、臨床意義：
（1）增 高：見于SLE、非活動性類風濕關(guān)節(jié)炎、惡性腫瘤早期、急性病毒感染、再障。
（2）減 低：見于乙肝及攜帶者、哮喘、活動性類風濕關(guān)節(jié)炎等。
第二節(jié) 細胞免疫檢測