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地塞米松對蛋清誘發(fā)大鼠足跖腫的影響實驗——周長法

山東朱氏藥業(yè)集團有限公司2022/11/7 21:18:39

2019.4.091174實驗方法原理異體蛋白進(jìn)入機體后可在短時間內(nèi)引起組織的急性炎癥反應(yīng)，發(fā)生炎癥的部位明顯腫脹、體積增大。腎上腺皮質(zhì)激素可通過多種方式明顯抑制**致炎因素引起的炎癥，從而改善紅、腫、熱、痛等癥狀。本實驗通過測定大鼠踝關(guān)節(jié)腫脹程度，觀察炎癥的發(fā)生及地塞米松的抗炎作用。實驗材料大鼠試劑、試劑盒地塞米松磷酸鈉生理鹽水雞蛋清吲哚美辛混懸液儀器、耗材容積測量裝置注射器天秤軟尺線棉手套記號筆大鼠固定器鼠籠灌胃針燒杯實驗步驟一、周長或測量法




⒈  取禁食過夜、體重相近的雄性大鼠3只，稱重并分別以不同記號標(biāo)記甲鼠、乙鼠、丙鼠，每只大鼠生理鹽水5 ml灌胃，以**大鼠體內(nèi)水分相同。




⒉  甲鼠腹腔注射0.5％地塞米松磷酸鈉注射液5 mg/Kg（0.5％溶液1 ml/Kg）、乙鼠灌胃給予1％吲哚美辛混懸液10 mg/Kg（1％混懸溶液1 ml/Kg）、丙鼠腹腔注射生理鹽水1 ml/Kg。于左或右后肢的踝關(guān)節(jié)處用沾有油漆的絲線作一圓周形標(biāo)記，再用絲線繞標(biāo)記測量周長或厚度千分尺測量厚度兩次。30 分鐘后，在大鼠左或右后足掌腱膜下向踝關(guān)節(jié)周圍用5 號針頭注入新鮮雞蛋清0.1ml，以后每隔10 分鐘測量大鼠左或右后踝周長或厚度，連測6次，用致腫前后左后踝周長厚度之差，作為踝關(guān)節(jié)腫脹程度。




二、容積法




⒈  取禁食過夜、體重相近的雄性大鼠3只，稱重并分別以不同記號標(biāo)記甲鼠、乙鼠、丙鼠，每只大鼠生理鹽水5 ml灌胃，以**大鼠體內(nèi)水分相同。




⒉  甲鼠腹腔注射0.5％地塞米松磷酸鈉注射液5 mg/Kg（0.5％溶液1 ml/Kg）、乙鼠灌胃給予1％吲哚美辛混懸液10 mg/Kg（1％混懸溶液1ml/Kg）、丙鼠腹腔注射生理鹽水1 ml/Kg。于左或右后肢的踝關(guān)節(jié)處用沾有油漆的絲線作一圓周形標(biāo)記，以排水法測量大鼠左后足之正常容積（以ml 表示）。30 分鐘后，在大鼠左后足掌腱膜下向踝關(guān)節(jié)周圍注入新鮮雞蛋清0.1 ml，以后每隔10 分鐘測量大鼠左后踝容積，連測6 次，用致腫前后左后踝容積之差，作為踝關(guān)節(jié)腫脹程度。




⒊  排水法操作步驟：




⑴轉(zhuǎn)動三通活塞D，使 A與B相通。將水推到吸管“O”處，接著關(guān)閉B，使A 與C相通。




⑵注射器的水推完，使玻管C 內(nèi)液面與其刻度圈平齊（玻管C 內(nèi)水量多少可用滴管直接調(diào)節(jié)）。




⑶每次測量位置相同，可用記號筆或黑漆在實驗大鼠左后踝關(guān)節(jié)劃一標(biāo)記，然后將左后肢拉直置入玻管C內(nèi)，抽動注射器針芯，使左后肢標(biāo)記處與玻管C上的刻度相平。待玻管C內(nèi)液面與其刻度相平時，立即關(guān)閉C，使A與B相通，隨即取出大鼠后肢。




⑷將注射器內(nèi)剩余液體**推入吸管B，記錄水柱高度。此時吸管B 內(nèi)顯示的水柱高度即代表所測踝關(guān)節(jié)腫脹程度的容積。




三、結(jié)果










將實驗室各組實驗結(jié)果算出平均值，以橫坐標(biāo)表示時間（分），縱坐標(biāo)表示關(guān)節(jié)腫脹周長或容積，繪制成坐標(biāo)圖。展開 注意事項⒈  周長或厚度測量法：測量周長的軟皮尺不能有彈性，刻度以0.2 mm左右為宜，測量部位盡量少移動，每次測量的寬緊度必須一致。測量動作要熟練，要由專人負(fù)責(zé)，盡量減少誤差。注射致炎劑時，實驗者應(yīng)將動物后肢拉直，先自跖中部皮下向上注入一部分，然后掉轉(zhuǎn)針頭向下注完。




⒉  容積法：在每一次測量之前，都要調(diào)節(jié)C和B的零點，若因大鼠肢體帶走部分水分，則必須把水補充到玻管C的刻度處，再按上述順序測量。