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用葉圓片沉浮法觀察環(huán)境因素對(duì)光合作用的影響

山東朱氏藥業(yè)集團(tuán)有限公司2022/10/27 6:48:35

原理

用真空滲入法排除葉肉細(xì)胞間隙的氣體，充以水溶液，使葉圓片沉于水中。在光合作用過(guò)程中，葉圓片吸收CO-2而放出氧氣，由于氧在水中的溶解度很少，并在細(xì)胞間和葉表面積累，結(jié)果使原來(lái)下沉的葉圓片上浮，根據(jù)上浮所需的時(shí)間長(zhǎng)短，即能衡量光合作用的強(qiáng)弱。改變測(cè)定體系的CO-2濃度，溫度和光強(qiáng)等，就能觀察這些因素對(duì)光合作用的影響。

器材與試劑

器材：照度計(jì)、溫度計(jì)、打孔器、注射器、小燒杯、光源、恒溫水浴、鑷子。

試劑： C02飽和的水溶液(用一玻管向100ml左右的水中吹氣數(shù)分鐘，或者用含20mmol/L)NaHCO-3的pH7.0，50mmol/L磷酸緩沖液(其他緩沖溶液也可)。

方法與步驟

1.打取葉圓片：從供試植物(棉花、蠶豆、青菜、油菜、蓖麻等)上選取健壯、葉齡相似、厚薄均勻的葉片數(shù)張，用直徑1cm左右的打孔器，避開(kāi)葉脈打下葉圓片60個(gè)(或更多一些，便于挑選好的)。

2.真空滲入：把打下的葉圓片放于大注射器中(30-50ml)，并注入水。排除注射器中空氣后，用手指堵住注射孔，用力向后拉活塞，即造成負(fù)壓，排出葉圓片內(nèi)的氣體，然后放開(kāi)手指，水即進(jìn)入葉組織中，如此重復(fù)數(shù)次，使葉圓片下沉。把下沉的葉圓片連同水一起倒入小燒杯中，置暗處備用。

3.設(shè)置處理：取100ml小燒杯6只，其中2只各倒20ml水(或pH7.050mmol/L磷酸緩沖液)，另外4只各加20mlC02飽和的水溶液(或含20mmol/LNaHCO3pH7.050mmol/L磷酸緩沖液)。然后于6只小燒杯中各放入葉圓片10個(gè)(葉圓片間不要重疊)，分別置于不同光強(qiáng)和不同溫度下，即設(shè)置如下處理(表10-1)，為要得到不同的光強(qiáng)，可把燒杯放置在離光源燈不同的距離處(用照度計(jì)測(cè)出該處照度)。為要獲得不同崐溫度，夏季可將小燒杯浸于冰中以獲得低溫，冬季可將小燒杯浸于溫水中以獲得高溫，(用溫度計(jì)測(cè)出實(shí)際溫度)。

4.觀察與分析：記錄各燒杯中每一葉圓片上浮所需的時(shí)間。以一定時(shí)間內(nèi)上浮的葉圓片數(shù)或上浮所需的平均時(shí)間來(lái)比較各杯葉圓片的光合作用強(qiáng)弱狀況，并分析光、溫、C02等因素對(duì)光合作用的影響。

參考文獻(xiàn)

山東農(nóng)學(xué)院、西北農(nóng)學(xué)院主編，1980，植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，山東科學(xué)技術(shù)出版社，84-87。