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地塞米松對蛋清誘發(fā)大鼠足跖腫的影響實驗

山東朱氏藥業(yè)集團有限公司2022/10/8 0:00:06

實驗方法原理

異體蛋白進入機體后可在短時間內(nèi)引起組織的急性炎癥反應(yīng)，發(fā)生炎癥的部位明顯腫脹、體積增大。腎上腺皮質(zhì)激素可通過多種方式明顯抑制**致炎因素引起的炎癥，從而改善紅、腫、熱、痛等癥狀。本實驗通過測定大鼠踝關(guān)節(jié)腫脹程度，觀察炎癥的發(fā)生及地塞米松的抗炎作用。

實驗材料 大鼠

試劑、試劑盒 地塞米松磷酸鈉生理鹽水雞蛋清吲哚美辛混懸液

儀器、耗材 容積測量裝置注射器天秤軟尺線棉手套記號筆 大鼠固定器鼠籠灌胃針燒杯

實驗步驟

一、周長或測量法







⒈  取禁食過夜、體重相近的雄性大鼠3只，稱重并分別以不同記號標記甲鼠、乙鼠、丙鼠，每只大鼠生理鹽水5 ml灌胃，以**大鼠體內(nèi)水分相同。







⒉  甲鼠腹腔注射0.5％地塞米松磷酸鈉注射液5 mg/Kg（0.5％溶液1 ml/Kg）、乙鼠灌胃給予1％吲哚美辛混懸液10 mg/Kg（1％混懸溶液1 ml/Kg）、丙鼠腹腔注射生理鹽水1 ml/Kg。于左或右后肢的踝關(guān)節(jié)處用沾有油漆的絲線作一圓周形標記，再用絲線繞標記測量周長或厚度千分尺測量厚度兩次。30 分鐘后，在大鼠左或右后足掌腱膜下向踝關(guān)節(jié)周圍用5 號針頭注入新鮮雞蛋清0.1ml，以后每隔10 分鐘測量大鼠左或右后踝周長或厚度，連測6次，用致腫前后左后踝周長厚度之差，作為踝關(guān)節(jié)腫脹程度。







二、容積法







⒈  取禁食過夜、體重相近的雄性大鼠3只，稱重并分別以不同記號標記甲鼠、乙鼠、丙鼠，每只大鼠生理鹽水5 ml灌胃，以**大鼠體內(nèi)水分相同。







⒉  甲鼠腹腔注射0.5％地塞米松磷酸鈉注射液5 mg/Kg（0.5％溶液1 ml/Kg）、乙鼠灌胃給予1％吲哚美辛混懸液10 mg/Kg（1％混懸溶液1ml/Kg）、丙鼠腹腔注射生理鹽水1 ml/Kg。于左或右后肢的踝關(guān)節(jié)處用沾有油漆的絲線作一圓周形標記，以排水法測量大鼠左后足之正常容積（以ml 表示）。30 分鐘后，在大鼠左后足掌腱膜下向踝關(guān)節(jié)周圍注入新鮮雞蛋清0.1 ml，以后每隔10 分鐘測量大鼠左后踝容積，連測6 次，用致腫前后左后踝容積之差，作為踝關(guān)節(jié)腫脹程度。




⒊  排水法操作步驟：







⑴轉(zhuǎn)動三通活塞D，使 A與B相通。將水推到吸管“O”處，接著關(guān)閉B，使A 與C相通。







⑵注射器的水推完，使玻管C 內(nèi)液面與其刻度圈平齊（玻管C 內(nèi)水量多少可用滴管直接調(diào)節(jié)）。







⑶每次測量位置相同，可用記號筆或黑漆在實驗大鼠左后踝關(guān)節(jié)劃一標記，然后將左后肢拉直置入玻管C內(nèi)，抽動注射器針芯，使左后肢標記處與玻管C上的刻度相平。待玻管C內(nèi)液面與其刻度相平時，立即關(guān)閉C，使A與B相通，隨即取出大鼠后肢。







⑷將注射器內(nèi)剩余液體**推入吸管B，記錄水柱高度。此時吸管B 內(nèi)顯示的水柱高度即代表所測踝關(guān)節(jié)腫脹程度的容積。







三、結(jié)果




將實驗室各組實驗結(jié)果算出平均值，以橫坐標表示時間（分），縱坐標表示關(guān)節(jié)腫脹周長或容積，繪制成坐標圖。







注意事項

⒈  周長或厚度測量法：測量周長的軟皮尺不能有彈性，刻度以0.2 mm左右為宜，測量部位盡量少移動，每次測量的寬緊度必須一致。測量動作要熟練，要由專人負責，盡量減少誤差。注射致炎劑時，實驗者應(yīng)將動物后肢拉直，先自跖中部皮下向上注入一部分，然后掉轉(zhuǎn)針頭向下注完。







⒉  容積法：在每一次測量之前，都要調(diào)節(jié)C和B的零點，若因大鼠肢體帶走部分水分，則必須把水補充到玻管C的刻度處，再按上述順序測量。